ⅠNucleic acidiyntroduksje
Nucleic acid is ferdield yn deoxyribonucleic acid (DNA) en ribonucleic acid (RNA), wêrby't RNA wurdt ferdield yn ribosomaal RNA (rRNA), messenger RNA (mRNA) en transfer RNA (tRNA) neffens syn ferskillende funksjes.DNA is benammen konsintrearre yn 'e kearn, mitochondria en chloroform, wylst RNA benammen ferspraat is yn it cytoplasma.As de materiële basis fan genekspresje spilet nukleïnesûrekstraksje in ekstreem wichtige rol yn molekulêre biologyûndersyk en klinyske molekulêre diagnoaze.De konsintraasje en suverens fan ekstraksje fan nukleïnesoeren sille direkt ynfloed hawwe op de folgjende PCR, sequencing, vectorkonstruksje, enzyme digestion en oare eksperiminten.
Ⅱ Nucleic acid ekstraksje en suvering metoade
① Fenol / chloroform ekstraksje metoade
Fenol / chloroform-ekstraksje is in klassike metoade foar DNA-ekstraksje, dy't benammen twa ferskillende organyske solvents brûkt om de samples te behanneljen, it oplossen fan DNA basearre nukleïnesûr yn 'e wetterfaze, lipiden yn' e organyske faze, en aaiwiten tusken de twa fazen.Dizze metoade hat de foardielen fan lege kosten, hege suverens en goede effekt.De neidielen binne komplisearre operaasje en lange tiid.
② Trizol metoade
Trizol-metoade is in klassike metoade foar RNA-ekstraksje.De Trizol-metoade is ferdield yn wetterige faze en organyske faze nei sintrifugaasje mei chloroform, wêryn it RNA wurdt oplost yn 'e wetterige faze, de wetterige faze wurdt oerbrocht nei in nije EP-buis, delslach wurdt krigen nei it tafoegjen fan isopropanol, en dan ethanol suvering.Dizze metoade is geskikt foar RNA-ekstraksje út dierlike weefsels, sellen en baktearjes.
③ Sintrifugale kolom suvering metoade
Centrifuge kolom suvering metoade kin adsorb DNA spesifyk troch spesjale silisium matrix adsorption materialen, wylst RNA en aaiwyt kin passe soepel, en dan brûk hege sâlt lege PH te kombinearjen nucleic acid, lege sâlt hege PH wearde eluaasje te skieden en suverjen nucleic acid.De foardielen binne hege suvering konsintraasje, hege stabiliteit, gjin ferlet fan organysk oplosmiddel, en lege kosten.It neidiel is dat it stap foar stap moat wurde sintrifugeare, mear operaasjestappen.
④ Magnetyske kralen metoade
De metoade fan magnetyske kralen is om it selweefselmonster troch it lysaat te splitsen, it nukleïnesûr yn 'e stekproef frij te litten, en dan wurde de nukleïnesûrmolekulen spesifyk op it oerflak fan' e magnetyske kraal adsorbearre, wylst ûnreinheden lykas aaiwiten en sûkers yn bliuwe. de floeistof.Troch de stappen fan splitsing fan selweefsel, magnetyske kraalferbining mei nukleïnesûr, nukleïnesûr wassen, nukleïnesûre eluaasje, ensfh., wurdt úteinlik suver nukleïnesûr krigen.De foardielen binne ienfâldige operaasje en koarte tiid gebrûk, sûnder de needsaak fan stap sintrifugering.It hat lege technyske easken en kin automatyske en massa operaasje realisearje.De spesifike kombinaasje fan magnetyske bead en nucleic acid makket it ekstrahearre nucleic acid mei hege konsintraasje en suverens.It neidiel is dat de hjoeddeiske merkpriis relatyf djoer is.
⑤ Oare metoaden
Neist de boppesteande fjouwer metoaden binne d'r siedende kraken, konsintrearre sâltmetoade, anionyske detergentmetoade, ultrasone metoade en enzymatyske metoade, ensfh.
Ⅲ Soart nukleïnesûr-ekstraksje
Foregene hat it liedende Direct PCR-platfoarm fan 'e wrâld, RNA-isolaasjeplatfoarm mei dûbele kolom (allinich DNA + RNA allinich).De wichtichste produkten omfetsje DNA / RNA isolaasje kits, PCR en Direct PCR reagents molekulêre lab reagents rige.
① Totale RNA-ekstraksje
Totale RNA-ekstraksjemonsters omfetsje bloed, sellen, dierlike weefsels, planten, firussen, ensfh. Hege suverens en hege konsintraasje fan totale RNA kinne wurde krigen troch totale RNA-ekstraksje, dy't brûkt wurde kinne yn RT-PCR, chipanalyse, in vitro-oersetting, molekulêre cloning, Dot Blot en oare eksperiminten.
Foarige relatearreRNA Isolaasje Kits
Animal Total RNA Isolation Kit--Fluch en effisjint ekstrahearje hege suverens en heechweardich totale RNA út ferskate dierlike weefsels.
Sel Totaal RNA Isolaasje Kit--Heech suvere en heechweardige totale RNA kin yn 11 minuten wurde krigen fan ferskate kweekte sellen.
Plant Totaal RNA Isolaasje Kit--Ekstrahearje fluch totaal RNA fan hege kwaliteit út plantmonsters mei lege polysaccharide- en polyfenolynhâld.
Virale RNA Isolaasje Kit--Isolearje en suverje virale RNA fluch út samples lykas plasma, serum, selfrije lichemsfloeistoffen en selkultuer-supernatanten.
② Genomyske DNA-ekstraksje
Genomyske DNA-ekstraksjemonsters omfetsje boaiem, feces, bloed, sellen, dierweefsels, planten, firussen, ensfh Genomyske DNA-ekstraksje kin brûkt wurde yn enzyme-fersmoarging, DNA-biblioteekkonstruksje, PCR, antykodykfoarming, Western blot hybridisaasjeanalyse, genchip, hege -throughput sequencing en oare eksperiminten.
Foarige relatearreDNA isolaasje kits
Animal Tissue DNA Isolaasje Kit- Snelle ekstraksje en suvering fan genomysk DNA út meardere boarnen, lykas dierlike weefsels, sellen, ensfh.
Bloed DNA Midi Kit (1-5ml)--Reinigje genomysk DNA fan hege kwaliteit fluch út antykoagulearre bloed (1-5ml).
Buccale Swab / FTA Card DNA Isolaasje Kit- Snel suverje heechweardich genomysk DNA fan buccale swab / FTA-kaartmonsters.
Plant DNA Isolaasje Kit- Fluch suverje en krije heechweardich genomysk DNA fan plantmonsters (ynklusyf polysaccharides en polyphenol-plantmonsters)
③ Plasmid ekstraksje
Plasmid is in soarte fan sirkulêre lyts molekule DNA yn sellen, dat is in mienskiplike drager foar DNA rekombinaasje.De metoade fan plasmide-ekstraksje is om RNA te ferwiderjen, plasmide te skieden fan baktearjele genomyske DNA, en proteïne en oare ûnreinheden te ferwiderjen om relatyf suver plasmide te krijen.
Algemiene Plasmid Mini Kit--Reinigje plasmide-DNA fan hege kwaliteit fluch fan omfoarme baktearjes foar routine molekulêre biologyske eksperiminten lykas transformaasje en enzyme digestion
④ Oare ekstraksjetypen, miRNA-ekstraksje, ensfh.
Animal miRNA Isolaasje Kit- Fluch en effisjint ekstrahearje lytse RNA-fragminten fan 20-200nt miRNA, siRNA, snRNA út ferskate bisteweefsels en sellen
Ⅳ Easken foar nukleïnesûrekstraksje en suveringsresultaats
① Om de yntegriteit fan 'e primêre struktuer fan nukleïnesûr te garandearjen.
② Ferminderje de ynterferinsje fan aaiwiten, sûkers, lipiden en oare makromolekulen
③ D'r moat gjin organysk oplosmiddel of hege konsintraasje fan metaalionen wêze dy't it enzym yn nukleïnesûrmonsters kinne remme.
④ RNA en oare nukleïnesûrkontaminaasje moatte wurde elimineare by it ekstrahearjen fan DNA, en oarsom.
Post tiid: Nov-24-2022
